DARTS技术在中药复方靶标鉴定中的研究进展

中药复方Traditional Chinese Medicine Formula因具有多成分、多靶点和整体调控的特点在疾病治疗中发挥着独特作用。然而复杂的化学组成也使药物靶标鉴定成为中药研究的重要难题。传统标记-钓取方法需要提前确定活性成分并完成探针修饰但面对含有数千种化学成分的复方体系实施难度较高。DARTS药物亲和响应靶标稳定性作为一种非标记Label-free技术无需改变药物天然结构即可完成全蛋白分析因此逐渐成为中药复方靶点筛选的重要技术。DARTS技术通过检测药物结合蛋白后的稳定性变化寻找候选靶标。实验前通常需要对复方样品进行预处理一般采用水溶后加入乙醇加热的方法去除多糖等杂质提高活性组分纯度。随后将提取物直接加入靶标细胞裂解液使复方中的不同活性成分根据亲和力分别结合目标蛋白从而提高蛋白抵抗蛋白酶降解的能力实现靶标筛选。相比LiP-MSDARTS在复杂样本分析中具有流程更加简洁的优势。LiP-MS需要两步酶解数据分析过程复杂同时在真核细胞样本中容易受到高丰度蛋白干扰。DARTS则结合SDS-PAGE完成蛋白分离可有效去除部分非特异性短肽再结合高质量质谱分析通常能够筛选出约50200个潜在靶点蛋白为后续GO功能富集分析及KEGG通路分析提供丰富的数据资源。目前中药复方作用机制研究多采用DARTSMS开展初步筛选再结合GO和KEGG分析寻找关键作用通路。例如当某复方具有明确抗炎作用而大量候选蛋白集中富集于NF-κB通路时可进一步推测这些蛋白与药物发挥药效密切相关。随后结合成分分析可进一步明确具体活性小分子及对应靶标实现复方作用机制的深入解析。除了质谱分析外DARTSWB也是常用的验证方法。该技术无需大型质谱设备在普通实验室即可完成。通过比较不同蛋白酶浓度下实验组与对照组蛋白条带变化可验证候选蛋白是否受到复方保护从而进一步证明药物与目标蛋白之间存在直接物理结合提高研究结果的可靠性。达吉特DARTS技术服务文献部分客户文献[1]. Zhou J, Song Q, Li H, et al. Targeting circ-0034880-enriched tumor extracellular vesicles to impede SPP1highCD206 pro-tumor macrophages mediated pre-metastatic niche formation in colorectal cancer liver metastasis. Mol Cancer. 2024;23(1):168. Published 2024 Aug 20. doi:10.1186/s12943-024-02086-9.(上海中医药大学附属曙光医院) IF27.7[2]. Zhang W, Song Y, Li C, et al. Canagliflozin Alleviates Diabetic Glomerular Endothelial Injury via Melibiose in a Microbiota-Dependent Manner. Adv Sci (Weinh). Published online May 27, 2026. doi:10.1002/advs.202517222.郑州大学第一附属医院IF14.1[3]. Yang X, Lin G, Chen Y, et al. Chlorquinaldol Alleviates Lung Fibrosis in Mice by Inhibiting Fibroblast Activation through Targeting Methionine Synthase Reductase. ACS Cent Sci. 2024;10(9):1789-1802. Published 2024 Aug 28. doi:10.1021/acscentsci.4c00798.广州医科大学IF12.7[4]. Liang Y, Zhang YL, Cheng TY, et al. Senkyunolide H potentiates bone marrow-derived mesenchymal stem cells therapy for liver cirrhosis by targeting MAEA to enhance ERK-driven HGF secretion. Pharmacol Res. 2026;226:108160. doi:10.1016/j.phrs.2026.108160.上海中医药大学IF10.5[5]. Zhao R, Lu Y, Xu Q, et al. Gut blautia coccoides-derived 5Z-dodecenoic acid attenuates chronic psychological stress-induced gastric cancer progression. Int J Surg. Published online November 20, 2025. doi:10.1097/JS9.0000000000004080.(中国人民解放军总医院第一医学中心) IF10.3[6]. Zhang S, Tang L, Pu Y, et al. Patchouli alcohol triggers autophagic cell death in non-small cell lung cancer cells through targeting GNAI1 to dissociate the GNAI1/ARRB1 complex. Int J Biol Sci. 2026;22(8):4004-4024. Published 2026 Mar 30. doi:10.7150/ijbs.125690.中国上海市宝山区吴淞中心医院IF10.0