真实案例分享：靶向肝星状细胞（HSCs）的AAV血清型怎么选？

肝星状细胞Hepatic Stellate CellsHSCs是肝脏中最主要的成纤维细胞类型虽然仅占肝脏细胞总数的5%–10%却在肝纤维化、肝硬化、肝癌以及代谢功能障碍相关脂肪性肝病MASLD等疾病的发生发展过程中发挥关键作用。因此如何在体内实现HSCs的精准靶向已经成为相关机制研究和基因功能验证的重要环节。那么在肝星状细胞研究中最常用的AAV血清型有哪些AAV6和AAV8是HSC研究中最常见的选择基于和元生物多年AAV载体开发经验以及大量肝脏疾病研究项目服务案例目前HSC相关研究中应用最广泛的AAV血清型主要为AAV6和AAV8。其中AAV8在肝脏基因递送领域具有广泛应用。由于其良好的肝脏转导能力许多研究会选择AAV8作为体内基因递送工具并结合肝星状细胞特异性启动子实现目标基因的精准表达或敲低。除了AAV8之外有研究发现AAV6对活化状态的肝星状细胞具有趋向性因此也被广泛应用于HSC相关研究尤其是在肝纤维化等伴随HSC活化的疾病模型中。AAV6可有效转导活化的肝星状细胞发表于《Cell Stem Cell》的研究对AAV6在肝星状细胞中的转导能力进行了验证。研究人员采用AAV6-EYFP进行体内递送无论是静脉注射还是肝内注射均能够有效转导活化的肝星状细胞表明AAV6对于活化HSCs具有良好的靶向潜力。这一发现也使AAV6成为许多肝纤维化研究中常用的血清型选择之一。图1 静脉注射左和肝内注射右AAV6-EYFP有效转导活化的肝星状细胞Milad Rezvani, et al., Cell Stem Cell, 2016AAV8广泛应用于肝星状细胞功能研究相比于AAV6AAV8在肝脏疾病研究中的应用更加广泛。根据和元生物服务的肝脏疾病研究项目经验研究人员通常会将AAV8与GFAP启动子结合使用实现目标基因在肝星状细胞中的特异性表达或敲低。近年来多项肝纤维化及MASLD相关研究均采用这一策略开展体内功能验证。案例一AAV8介导HSC特异性敲低Mmp7代谢功能障碍相关性脂肪性肝炎MASH是全球肝脏相关疾病和死亡的重要原因之一。上海交通大学医学院附属第六人民医院科研团队发表于《Cell Metabolism》的研究发现高糖饮食尤其是果糖可通过重塑肠道菌群代谢促进内源性乙醛生成进一步上调肝星状细胞中的MMP7表达推动MASLD向MASH进展。研究人员利用和元生物提供的AAV8结合GFAP启动子在肝星状细胞中特异性敲低Mmp7。结果显示HSC来源的MMP7被抑制后高脂高果糖饮食HFHFD诱导的肝纤维化得到显著缓解。图2 抑制HSCs来源的MMP7显著减弱纤维化Yajun Tang, et al., Cell Metabolism, 2026案例二AAV8介导HSC特异性敲低CK2α蛋白激酶CK2是一种促生存激酶其在肝纤维化中的作用此前尚不明确。温州医科大学研究团队发现CK2α与SmoothenedSMO结合是Hedgehog信号通路的重要正向调节因子。敲低CK2α能够减弱HSC活化及纤维化表型。研究中科研人员利用AAV8结合GFAP启动子在肝星状细胞中特异性敲低CK2α。结果显示该策略能够减少肝脏胶原沉积并缓解CCl4诱导的小鼠肝纤维化。图3 HSCs特异性敲低CK2α可减轻CCl4诱导的肝纤维化Junfu Fan, et al., British Journal of Pharmacology, 2022AAV6也可用于活化HSCs中过表达研究除了基因敲低AAV6还被用于活化肝星状细胞中的基因过表达研究。首都医科大学北京友谊医院研究团队发表于《Theranostics》的研究中利用和元生物的AAV6在活化HSCs中过表达Mfap2以探究其在肝纤维化中的作用。研究结果显示虽然HSC中过表达Mfap2并未改变肝纤维化的组织学进展但能够抑制肝内炎症反应以及细胞外基质重塑过程。图4 HSCs过表达Mfap2可抑制肝内炎症和细胞外基质重塑Wen Zhang, et al., Theranostics, 2025小结从现有研究和和元生物多年服务客户案例经验来看AAV6和AAV8是肝星状细胞研究中最常使用的两种AAV血清型。其中AAV8在肝脏基因递送领域应用广泛常与GFAP启动子联合使用实现HSC特异性基因敲低或表达AAV6被证实能够有效转导活化的肝星状细胞因此在肝纤维化相关研究中同样具有重要应用价值。在实际实验设计中研究人员可根据研究目标和疾病模型特点选择合适的AAV血清型开展肝星状细胞相关研究。