抗体芯片助力凋亡、应激信号通路研究

1、什么是细胞凋亡、细胞应激细胞凋亡细胞凋亡是一种程序性细胞死亡(PCD)其特征包括细胞皱缩、染色质凝聚、膜起泡和核碎裂。它对于形成和维持健康组织至关重要。细胞应激细胞应激是生物体为应对外界环境刺激或内部稳态失衡所触发的一系列分子调控过程。二者有什么联系严重的细胞应激可导致细胞凋亡2、凋亡信号通路有哪些1p53信号通路DNA损伤响应与凋亡调控p53被誉为“基因组守护者”当细胞发生DNA损伤时p53会被ATM/ATR激酶激活通过磷酸化修饰进而通过两种途径诱导细胞凋亡①转录激活作用p53可上调BH3-only蛋白如Puma、Noxa、死亡受体如Fas及凋亡相关基因如Bax的表达分别激活内源性与外源性凋亡通路②非转录作用p53直接进入线粒体与抗凋亡蛋白Bcl-2/Bcl-xL结合释放Bax/Bak最终促进线粒体损伤。2PI3K-AKT-mTOR信号通路营养感知与凋亡抑制该通路是细胞感知营养信号与调控生长的核心通路正常生理状态下的作用机制为PI3K激活后催化生成PIP3PIP3进一步招募AKT至细胞膜并使其激活激活的AKT通过磷酸化修饰抑制BH3-only蛋白例如Bad被磷酸化后会与细胞质锚定蛋白结合无法激活Bax同时可磷酸化并抑制GSK-3β、FoxO等转录因子减少凋亡相关基因的表达而mTOR作为AKT的下游分子能通过调控蛋白质合成维持细胞存活。 当该通路受到抑制如肿瘤治疗中使用PI3K抑制剂时AKT活性下降其对凋亡的抑制作用随之解除细胞更易发生凋亡。3NF-κB信号通路炎症与凋亡的双向调控NF-κB是调控炎症反应的核心转录因子且对细胞凋亡具有“双向调控”作用①抗凋亡作用在TNF-α刺激下NF-κB被激活可上调抗凋亡基因如Bcl-2、c-IAP、FLIP的表达从而抑制TNF-α诱导的细胞凋亡②促凋亡作用在持续炎症或DNA损伤条件下NF-κB则能上调促凋亡基因如FasL、TRAIL、Puma的表达促进细胞凋亡以避免受损细胞发生癌变。3、细胞应激与凋亡相关的信号通路有哪些细胞应激与凋亡相关的信号通路核心涵盖MAPK 通路、内源性线粒体通路、外源性死亡受体通路及内质网应激通路等这些通路并非独立作用而是通过构建复杂的调控网络相互协同在细胞面临应激时精准调控 —— 或维系细胞正常稳态或启动程序性死亡程序以保障细胞命运的合理选择。4、抗体芯片的原理、介绍抗体芯片(Anti-Array)技术被称为高通量“WB”可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度目前主要用于信号转导、蛋白 组学、肿瘤及其他疾病的相关研究具有微型化、集成化、高通量的特点。抗体芯片原理把能和不同抗原特异性结合的多种抗体高密度地固定到载体上使待测样品通过芯片表面经过洗脱把非特异性结合的蛋白洗掉从而对特异性结合在上面的抗原进行检测。抗体芯片适合于项目机制研究中初筛