一文看懂CY3.5-TCO 光谱、反应、应用全景

CY3.5-TCO 为兼具红光荧光特性与 IEDDA 生物正交反应活性的双功能标记试剂分子架构分为三部分Cy3.5 荧光发色母核、烷基或 PEG 柔性连接链、反式环辛烯TCO反应官能团。该产品凭借四嗪介导的快速点击化学反应与近红外荧光显像双重优势可应用于活细胞标记、生物样本追踪以及纳米载体的表面修饰工作。一、光谱参数Cy3.5 发色单元成像基础两种产品剂型溶解区分1、脂溶性 CY3.5-TCO可溶于 DMSO、甲醇、二氯甲烷多用于有机相改性 PLGA、疏水纳米材料2、磺化水溶性 CY3.5-TCO直接溶于中性 PBS 缓冲液适配蛋白标记、活细胞水相孵育实验。关键末端 TCO 官能团不会干扰 Cy3.5 原有荧光光谱与发光效率。二、反应特性TCO-四嗪 IEDDA 超快点击化学1. 反应原理TCO反式环辛烯与四嗪发生逆电子需求狄尔斯-阿尔德IEDDA[42] 环加成反应脱除氮气生成稳定二氢哒嗪共价环结构。2. 核心反应优势• 反应速率超快速率常数 10⁵~10⁶ M⁻¹・s⁻¹常温 PBS 体系数分钟完成偶联效率远超 DBCO-N₃ SPAAC 反应• 无金属催化全程无需铜离子无细胞Poison 性兼容活细胞与活体体内原位修饰• 靶向专一性强生理环境只特异性结合四嗪基团不和氨基、羟基、巯基发生副反应非特异性结合极低• 反应条件温和pH7.08.5 生理环境即可反应适配细胞培养液、血清复杂体系。配对底物仅可与各类四嗪修饰原料反应四嗪多肽、四嗪标记抗体、Tetrazine-PEG-PLGA、四嗪改性 DSPE 磷脂、四嗪修饰无机纳米颗粒。三、实际应用全景1. 生物大分子定点荧光标记多肽、抗体、蛋白预先用四嗪-NHS 活化引入四嗪位点再与 CY3.5-TCO 点击标记制备荧光探针用于免疫荧光染色、流式细胞分析也可对细胞膜蛋白原位活体标记追踪蛋白胞吞转运路径。2. 纳米药物载体可视化修饰• 高分子纳米粒修饰四嗪的 PLGA 纳米球与 CY3.5-TCO 偶联体外观测细胞摄取效率、活体追踪靶向富集• 脂质体体系四嗪-DSPE-PEG 掺入脂质双分子层表面定点荧光标记监测药物体内循环与脏器分布• 无机纳米载体四嗪改性介孔硅、四氧化三铁磁珠偶联后构建荧光-磁性双模态诊疗探针。3. 小动物活体近红外成像660nm 发射波长组织穿透性良好背景荧光干扰小用于靶向制剂体内药效评价、tumor边界荧光定位。4. 双荧光正交共定位搭配 CY3.5-TCOTCO-四嗪Cy5-DBCODBCO-N₃双标记体系载体同步修饰叠氮与四嗪实现双通道荧光共定位观测。选型速记DBCO 配对叠氮反应偏慢TCO 搭配四嗪瞬时偶联NHS 遇水极易水解失效TCO 生理环境稳定性更佳Cy3.5 负责红光荧光示踪活体靶向标记优选 CY3.5-TCO。——以上资料由XARuiXi小编提供仅用于科研